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动物医学论文 根皮苷对高血脂症动物降血脂功效的研究

2019-01-26 14:21:06来源:组稿人论文网作者:婷婷

  摘 要:以仓鼠为研究模型,通过喂饲高脂血症仓鼠不同剂量的根皮苷(0-0.9%),对根皮苷的降血脂作用进行研究。结果与高脂模型组比较,给药组主要降低了仓鼠血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的含量,升高了高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量;血清中丙二醛(MDA)含量显著降低(p<0.05,p<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力均显著升高(p<0.05,p<0.01)。

  关键词:根皮苷;仓鼠;降血脂;高脂血症

  0 引言

  目前心脑血管疾病发生率、死亡率均居世界之首,约为恶性肿瘤的两倍,其中由动脉硬化症引起的冠心病是造成人类死亡的主要原因。许多研究已经证明高脂血症是导致冠心病(CAD)的重要因素,冠心病 (CAD)的危险性、死亡率随总胆固醇(TC)的升高而增加,特别是与低密度脂蛋白胆固醇(LDL–C)水平呈明显正相关。

  近年来,大量的人体和动物研究证明,苹果多酚具有抗氧化,预防心脑血管疾病,预防糖尿病,降血脂和降胆固醇等活性。根皮苷是苹果多酚中的主要活性成分,根皮苷在治疗糖尿病方面有很好的疗效,并且也有一定的降血脂和抗氧化作用。本研究就根皮苷对高脂血症仓鼠的血脂水平及酶活力的影响进行了研究。

  1 材料与方法

  1.1 材料与试剂

  仓鼠(Syrain Hamster,Mesocricetus Auratus),45只,125±10g,雄性,北京维通利华实验动物技术有限公司;基础饲料 北京维通利华实验动物技术有限公司;胆固醇 湖北远成药业有限公司;根皮苷 天津尖峰天然产物研究开发有限公司;总胆固醇(TC)试剂盒、甘油三酯(TG)试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒 中生北控生物科技股份有限公司;丙二醛(MDA)测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测试盒、超氧化物歧化酶(SOD)测试盒 南京建成生物工程研究所。

  1.2 仪器与设备

  UVmini-1240紫外可见分光光度计 日本岛津制作所;MR23i冷冻离心机 法国JOUAN公司;FA1604S电子天平 上海天平仪器厂;TDA8002电子恒温水浴锅 天津市中环实验电炉有限公司;SHB-Ⅲ循环水真空泵 郑州长城科工贸有限公司; SHZ-88型台式水浴恒温振荡器 江苏太仓市实验设备厂。、

  1.3 动物饲养条件及实验分组

  动物饲养条件:屏障系统动物房,温度(22±2)℃,相对湿度40%~60%,控制照明时间为14h。适应一周后开始实验。

  收稿日期:

  基金项目:黄河水利职业技术学院校内科研基金资助计划项目(2017KXJS013):根皮苷对高血脂症动物降血脂功效的研究;河南省高等学校青年骨干教师培养计划(2017GGJS224):苹果根皮苷降血脂活性及调控机理。

  作者简介:王振强(1979—),男,汉族,副教授,硕士,主要从事食品加工检测分析教学与研究

  实验分组:将健康仓鼠随机分成5组(n=9),分别为空白对照组、模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。其中空白对照组喂饲基础饲料,模型组喂饲高脂高胆固醇饲料,低、中、高剂量组分别喂饲添加0.3%、0.6%和0.9%(m/m)根皮苷的高脂高胆固醇饲料,由实验各组仓鼠自由取食8周。每周对仓鼠称体重一次,记录仓鼠日摄食量。饲料配方如下表1所示。

  表1 饲料配方

  Tab.1 Feed formula

  组别添加量/%

  空白组

  模型组

  低剂量组

  中剂量组基础饲料/%

  100.0

  89.9

  89.6

  89.3猪油/%

  8.0

  8.0

  8.0明胶/%

  2.0

  2.0

  2.0胆固醇/%

  0.1

  0.1

  0.1 根皮苷/%

  0.3

  0.6高剂量组89.08.02.00.10.9喂饲3周和6周后,分别对仓鼠禁食不禁水12小时,眼底静脉丛取血,4℃离心分离血清,测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,喂饲8周后,禁食不禁水12小时,用N2麻醉仓鼠,摘掉眼球取血后解剖。仓鼠血液4℃离心分离得到血清,-80℃保存,用于后期检测。收集主要脏器,称重并进行脏器指数分析(脏器指数=脏器重量/体重*100%)。

  1.4 血脂指标的测定

  测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,测定方法参照测定生化试剂盒(non-HDL-C=TC - HDL-C)。

  1.5 血清中酶活力的测定

  测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力,测定方法参照生化试剂盒。

  2 结果与分析

  2.1 仓鼠体重及摄食量变化

  各组仓鼠体重和摄食量随着饲养时间的变化趋势如图1和图2所示。

  图1 仓鼠体重变化趋势

  Fig. 1 The bodyweight tendency of hamsters

  图2 仓鼠摄食量变化趋势

  Fig. 2 The food intake tendency of hamsters

  由图1可知,饲养8周后各剂量组仓鼠体重与模型组和正常组比较均无显著性差异(p>0.05);由图2可知,仓鼠的每周平均摄食量各组之间没有显著性差异(p>0.05)。由此可知,根皮苷的加入对仓鼠的体重和摄食量均无显著的影响。

  2.2根皮苷对高血脂症仓鼠各脏器指数的影响

  根皮苷对高脂血症仓鼠各脏器指数的影响(n=9)结果如表2。

  表2根皮苷对高脂血症仓鼠各脏器指数的影响(n=9)

  Tab.2 Effects of phloridzin on organ indices of hyperlipidemia hamsters(n=9)

  项目空白组模型组低剂量组中剂量组高剂量组肝脏指数/100g体重3.68±0.194.33±0.40△4.15±0.224.07±0.083.87±0.37 *肾脏指数/100g体重0.65±0.060.66±0.080.65±0.020.66±0.090.63±0.06心脏指数/100g体重0.33±0.02

  0.31±0.030.33±0.020.34±0.030.32±0.02生殖器指数/100g体重2.23±0.152.22±0.132.29±0.182.25±0.262.11±0.09注:△ 模型组与空白组比较p<0.05;* 剂量组与模型组比较p<0.05。

  由表2可知,模型组与空白组比较,肝脏指数显著升高(p<0.05);模型组其他脏器指数与空白组不存在显著性差异(p>0.05)。剂量组与模型组比较,高剂量组肝脏指数显著降低(p<0.05);其他脏器指数与模型组均不存在显著性差异(p>0.05)。

  2.2根皮苷对高脂血症仓鼠血清胆固醇和血脂水平的影响

  根皮苷对高脂血症仓鼠血液总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的影响如表3-表6所示。

  表3 根皮苷对高脂血症仓鼠血液总胆固醇(TC)的影响(n=9)

  Tab. 3 Effects of phloridzin on Serum total cholesterol of hyperlipidemia hamsters(n=9)

  项目空白组模型组低剂量组中剂量组高剂量组0周155.23±15.76156.89±13.78157.54±14.44157.35±14.23157.65±15.553周163.42±9.32367.68±79.76△337.23±60.13313.30±38.66*337.40±49.096周168.28±12.73367.91±57.01△311.39±23.12307.51±23.36300.38±31.71*8周167.19±17.30323.66±37.58△275.44±31.51*263.56±27.52*264.59±26.58*注:△ 模型组与空白组比较p<0.01;* 剂量组与模型组比较p<0.05。

  由表3可知,剂量组与模型组比较,仓鼠血液中总胆固醇(TC)的含量呈降低趋势,第3周测得的总胆固醇(TC)的含量,中剂量组与模型组间差异显著(p<0.05),第6周和第8周测得的总胆固醇(TC)的含量随根皮苷添加量的增加呈降低趋势,高剂量组与模型组比较具有显著性差异(p<0.05)。由此可知,根皮苷可以显著降低高脂血症仓鼠血液的总胆固醇(TC)含量。

  表4 根皮苷对高脂血症仓鼠血液高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的影响(n=9)

  Tab. 4 Effects of phloridzin on Serum HDL-C of hyperlipidemia hamsters(n=9)

  项目空白组模型组低剂量组中剂量组高剂量组0周85.15±8.1886.23±9.5384.94±14.1187.65±8.5783.74±15.383周91.14±11.6377.27±10.81△95.28±26.8499.82±14.21**104.01±34.25*6周88.03±15.10113.67±15.00134.27±16.46*155.71±29.64**138.41±23.518周90.75±11.7099.55±9.44134.82±37.98189.82±85.93*136.07±26.34*注:△ 模型组与空白组比较p<0.01;* 剂量组与模型组比较p<0.05;** 剂量组与模型组比较p<0.01。

  由表4可知,剂量组与模型组比较,仓鼠血液中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量呈增加趋势,低、中、高剂量组与模型组间均有显著性差异(p<0.05,p<0.01)。

  表5 根皮苷对高脂血症仓鼠血液甘油三酯(TG)的影响(n=9)

  Tab.5 Effects of phloridzin on Serum triglyceride of hyperlipidemia hamsters(n=9)

  项目空白组模型组低剂量组中剂量组高剂量组0周256.25±56.41254.91±63.56249.29±65.67252.92±69.93266.10±69.543周244.49±26.56499.97±73.78△412.52±100.26379.59±57.60*387.66±89.256周230.63±32.15474.23±109.82△410.03±155.73400.73±129.62396.23±68.378周221.37±21.73479.11±40.64△357.92±83.56*337.66±77.48**335.97±65.30**注:△ 模型组与空白组比较p<0.01;* 剂量组与模型组比较p<0.05;** 剂量组与模型组比较p<0.01。

  由表5可知,剂量组与模型组比较,仓鼠血液中甘油三酯(TG)的含量呈降低趋势,第8周测得的甘油三酯(TG)的含量随根皮苷添加量的增加而降低,低、中、高剂量组与模型组间均差异显著(p<0.05,p<0.01)。

  表6 根皮苷对高脂血症仓鼠血液非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的影响(n=9)

  Tab. 6 Effects of phloridzin on Serum non-HDL-C of hyperlipidemia hamsters(n=9)

  项目空白组模型组低剂量组中剂量组高剂量组0周69.18±13.7671.41±7.0572.60±13.1871.21±13.6173.96±11.133周71.67±12.65307.97±83.40△237.23±57.24227.57±35.24*234.54±31.276周79.67±15.08281.27±66.11△170.38±36.27*163.84±25.48*169.69±49.46*8周74.69±16.17225.90±56.59△134.24±27.53*106.62±12.75**113.01±7.12*注:△ 模型组与空白组比较p<0.01;* 剂量组与模型组比较p<0.05;** 剂量组与模型组比较p<0.01。

  由表6可知,剂量组与模型组比较,仓鼠血液中非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的含量呈降低趋势,第3周测得的非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的含量,中剂量组与模型组间差异显著(p<0.05);第6周和第8周测得的非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的含量,低、中、高剂量组与模型组间均有显著性差异(p<0.05,p<0.01)。

  由表3-表6可以看出,模型组与空白组比较,仓鼠血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的含量均显著升高;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量显著降低,说明高血脂模型建造成功。

  2.3根皮苷对高脂血症仓鼠血清中酶活力的影响

  根皮苷对高脂血症仓鼠血清中酶活力的影响实验结果如图3-图5所示。

  图3 根皮苷对高脂血症仓鼠血清MDA的影响

  Fig. 3 Effects of phloridzin on Serum Maleic Dialdehyde of hyperlipidemia hamsters

  注:## 模型组与空白组比较p<0.01;* 剂量组与模型组比较p<0.05;** 剂量组与模型组比较p<0.01。

  图4 根皮苷对高脂血症仓鼠血清GSH-PX的影响

  Fig. 4 Effects of phloridzin on Serum GSH-PX of hyperlipidemia hamsters

  注:# 模型组与空白组比较p<0.05;* 剂量组与模型组比较p<0.05;** 剂量组与模型组比较p<0.01。

  图5 根皮苷对高脂血症仓鼠血清SOD的影响

  Fig. 5 Effects of phlordzin on Serum SOD of hyperlipidemia hamsters

  注:* 剂量组与模型组比较p<0.05。

  由图3-图5可知,剂量组与模型组比较,均能有效的降低血清MDA含量,提高血清SOD、GSH-PX活力。

  3 结论

  根皮苷具有显著的降血脂功效,主要表现为降低仓鼠血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)的含量,同时升高了高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量。高脂高胆固醇膳食的喂养引起了仓鼠机体的脂质过氧化,生成大量的丙二醛(MDA),但是根皮苷的摄入降低了MDA的生成量,同时根皮苷的摄入也显著提高了血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和超氧化物歧化酶(SOD)活力。

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